Итак, ответ.
1. Пауза не допускается
Главное не улыбАйтесь. У московитов улыбка почитается знаком слабости.
Это инструктаж, причем короткий – времени очень мало. Два предложения связаны причинно-следственной связью и одной темой, нужен быстрый переход от одной мысли к другой.
Поэтому пауза не допускается, никакая. Но в первом предложении всего два слова. Если поставить запятую после вводного «главное», пауза в любом случае будет обозначена. Значит, первое слово обособлять очень нежелательно.
2. Как объяснить отсутствие знака
Мы знаем, что большинство вводных слов имеет парные наречия, которые не обособляются. Тогда «главное» здесь следует считать наречием с обстоятельственным значением. Это и есть короткое объяснение.
Замена обстоятельством-синонимом возможна, например: Ни в коем случае не улыбайтесь. Или: Обязательно улыбайтесь (в утвердительном варианте).
Также возможен вариант с частицей: Только не улыбайтесь.
Но значение наречия даже указано в словаре: Главным образом, в зн. нареч. Преимущественно, в основном. Давит главным образом быт. Собрались главным образом ветераны.
3. Пример
Главное не оглЯдывайся, иначе тебя заметят. Иди быстро, уверенно.
В таком тексте пауза тоже нежелательна (быстрое развитие темы).